原代細胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內表面，即可進行傳代培養(yǎng)。
兔卵巢表面上皮細胞
細胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 兔卵巢表面上皮細胞 | 組織來源 | 卵巢 |
種屬 | 兔 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 圓形、卵圓形或多角形 | 英文名稱 | Ovarian Surface Epithelial Cells |
貨號 | EY-XY3873 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測：細胞角蛋白-19（CK-19）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：兔卵巢表面上皮細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
大約85%的卵巢癌來源于卵巢表面上皮，它的發(fā)生是一個多因素作用、多基因參與、經(jīng)過多個階段才終形成的及其復雜的生物學過程。因此，體外培養(yǎng)卵巢表面上皮細胞為研究卵巢表面上皮的功能及其逐步癌變過程對卵巢癌的防治起著重要作用。此外，有研究表明，表皮生長因子對卵巢表面上皮細胞的生長和狀態(tài)十分有益。 |
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 ，英文名： β-Cat ELISA Kit
大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA檢測試劑盒Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISAkit 96T/48T
人P27蛋白(P27)免疫試劑盒 Human P27 protein ELISA Kit
英文名稱MousesE-selectin[CD-62E]ELISAKit小鼠可溶性E-選擇素(sE-selectin[CD-62E])規(guī)格：96T/48T
胞漿S轉移酶(GSHST)活性比色法定量檢測試劑盒20次
RabbitThromboxaneB2,TX-B2ELISA試劑盒兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human single sanded DNA aibody / denatured DNA aibody (ssDNA) ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒
PorcineIerferonγ,IFN-γELISAKit 豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAg-NORs(HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins)ELISAKit人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白規(guī)格：48T/96T
血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量檢測試劑盒20次
MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔卵巢表面上皮細胞植物血凝素（PHA）ELISAKit ELISA. 96T/48T
植物生長激素（GH）ELISAKit ELISA. 96T/48T
植物凝脂酸（PA）ELISAKit ELISA. 96T/48T
植物吲哚乙酸（IAA）ELISAKit ELISA. 96T/48T
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細胞培養(yǎng)實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中，該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。