收到CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞培養(yǎng)后的處理:
1)收到細胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細胞的生長狀況,有無細胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細胞漂浮嚴重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個大離心管中,留一點吹打細胞沉淀成懸液,回收細胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補加自己新配的培養(yǎng)基至適當容積,例如4ml,讓細胞適應一下環(huán)境。 當細胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
產(chǎn)品名稱:CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞培養(yǎng)
英文名稱:CT26.WT mouse colon cancer cells
培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
產(chǎn)品運輸:免費快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對于常溫運輸?shù)募毎?,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募毎?,請取出冷凍管后,須立即放?7C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
?注意事項:
1)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
雙甘膦N-(Carboxymethyl)-N-(phosphonomethyl)-glycine
三丁基氧化錫Bis(tributyltin) oxide
1-萘Fluoronaphthalene
貝他定(丁抑制素)Ubenimex
鄰二酸二庚酯DI-N-HEPTYL PHTHALATE
間-DL-酪氨酸3-FLUORO-DL-TYROSINE
D-甘露糖D-(+)-Mannose
對氨基水楊酸Sodium 4-aminosalicylate
虎紅瓊脂Agar rose bengal
4-基化芐4-Nitrobenzyl chloride
正丁基二(1-金剛烷基)膦Butyldi-1-adamantylphosphine
己二酸新二醇聚酯NA
1,5-萘二磺酸Disodium 1,5-naphthalenedisulfonate
鹵惡唑侖Haloxazolam
糖化酶AMYLOGLUCOSIDASE
CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞培養(yǎng)GAS2L1 生長停滯特異性蛋白2家族1抗體 * 0.2ml Rhodamine 110 chloride
GAS2L3 生長停滯特異性蛋白2家族3抗體 * 0.2ml Rhodamine 123
GilZ/TilZ 糖皮質(zhì)激素誘導亮拉鏈蛋白抗體 * 0.2ml Trimebutine base
MIER2 中胚層誘導早期反應蛋白2抗體 * 0.2ml 6-Carboxytetramethylrhodamine
IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein 分相關基因2蛋白/立即早期反應蛋白抗體 * 0.2ml 6-TAMRA, SE
IL-4I1 白細胞介素4誘導蛋白1抗體 * 0.2ml Ovalbumin/Egg albumins
JMJD6 凋亡細胞清除受體抗體 * 0.2ml Miltefosine
MAGED1 黑色素瘤相關抗原D1抗體 * 0.2ml Miltefosine
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